建立高特异性和高灵敏度的小鼠血清瘦素(Leptin) 放射免疫分析方法,用于测定小鼠血清中瘦素水平。用国外Peprotech公司进口的人工重组的小鼠leptin 多次免疫兔子获取高效价、高特异的小鼠leptin 抗体。用氯氨T 法制备125 I 标记的leptin , 经Sep2hadex G225 纯化。抗原抗体反应采用平衡一步法, 4 ℃培养24 h 后经PR 试剂分离结合和游离的标记抗原。该法测定范围为1. 1～300 ng/mL , 最低检出值为0. 5 ng/mL ,批内和批间误差小于4. 4 %和6. 7 %。
用该法测定正常小鼠23 例,血清leptin为(39. 65 ±15. 72) ng/mL ,而人leptin 放射免疫法为(1. 56 ±0. 45) ng/mL ,具有显著的差异,2 组数据有中等程度的相关性( r = 0. 621 8) 。用该法测定正常人样本30 例,血清leptin 为(19. 46 ±7. 09) ngPmL ,而人leptin 放射免疫法为(10. 08 ±5. 20 ) ng/mL ,具有显著差异,但不存在明显的相关性( r = - 0. 095 9) 。
用该法发现烫伤大鼠血清leptin 明显下降(14. 33 ±3. 52) ng/mL 与(6. 71 ±3. 14) ng/mL ,烫伤大鼠切痂后leptin 于96 h 内恢复正常水平(12. 08 ±4. 05) ngPmL。该法稳定、简便、特异、灵敏,适于检出小鼠和大鼠血清中的leptin 水平, 而不适合于检测人血清内leptin 水平。
本公司开发的鼠类LEPTIN方法，可以提供动物样品血清样品检测服务，每样品检测费30元人民币！