核酸外切酶I（Exonuclease I）是一种对变性或单链脱氧核糖核酸具有高度选择性的核酸外切酶，作用时，Exonuclease I从单链聚脱氧核糖核苷酸的3 羟基端开始攻击，随后逐步释放出脱氧核糖核苷5 ' -单磷酸盐，但末端二核苷酸会保持完整，对双链DNA或RNA无活性。常用于在Sanger测序或SNP分析之前去除PCR反应中的单链引物、去除巢式PCR中的单链引物、PCR产物酶法纯化、从核酸混合物中去除含有3'羟基末端的单链DNA等。
图1. Exonuclease I降解单链DNA示意图
翌圣的Exonuclease I（Cat#14535ES）由分子酶改造平台——ZymeEditor™重组表达而来，可高效消化单链DNA，严格质控，无核酸外切酶（双链）、核酸内切酶、RNase残留，80℃处理即可失活，适用于各种PCR反应后引物的去除及从核酸混合物中去除含有3'羟基末端的单链DNA。
数据展示
01
单链DNA消化能力与进口品牌一致
20 μL反应体系中加入终浓度为15 pmol/μL的单链DNA底物，分别使用不同投入量（0.63、1.25、2.5、5、10、20 U）的翌圣及进口品牌N*的Exonuclease I在37℃下孵育15 min，80℃热失活15 min，聚丙烯酰胺凝胶电泳检测单链DNA降解情况。结果显示翌圣的Exonuclease I消化单链DNA的能力与进口品牌N*一致。
图2. 翌圣及进口品牌N*对单链DNA的消化能力
02
无核酸内切酶残留
将500 ng底物DNA与100 U的Exonuclease I在37℃下孵育4 h，琼脂糖凝胶电泳检测DNA条带不发生变化，表明Exonuclease I无核酸内切酶残留。
图3. 核酸内切酶残留检测
03
无RNase残留
将底物RNA与20 U的Exonuclease I在37℃下孵育4 h，琼脂糖凝胶电泳检测RNA条带不发生变化，表明Exonuclease I无RNase残留。
图4. RNase残留检测
