植物蔗糖含量测定试剂盒 微量法
产品名称: 植物蔗糖含量测定试剂盒 微量法
英文名称:
产品编号: BC2465
产品价格: 0
产品产地: 北京市通州区马驹桥联东U谷85A三
品牌商标: Solarbio
更新时间: 2024-12-16T14:04:43
使用范围: null
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植物蔗糖含量测定试剂盒产品内容:
提取液:液体 100mL×1瓶,4℃保存;
试剂一:液体1mL×1支,4℃保存;
试剂二:液体2mL×1瓶,4℃保存;
试剂三:液体 20mL×1瓶,4℃保存;
试剂四:液体 5mL×1瓶,4℃保存;
试剂五:粉剂0.5g×1瓶,常温保存。
产品说明:
蔗糖是植物光合作用的主要产物,也是糖分运输和储藏的主要形式。因此,测定蔗糖含量对于植物糖代谢具有重要意义。此外,蔗糖含量是饮料﹑蜂蜜、果脯﹑糖果和乳制品等产品质量控制的重要指标之一。
先用碱与样品共热,破坏其中的还原糖。然后在酸性条件下将蔗糖水解生成葡萄糖和果糖,果糖进一步与间苯二酚反应,生成有色物质,在480nm 下有特征吸收峰。
试验中所需的仪器和试剂:
可见分光光度计/酶标仪、水浴锅、可调式移液器、微量玻璃比色皿/96孔板和蒸馏水。
植物蔗糖含量测定试剂盒操作步骤:
一、样品制备:
称取约0.1g样本,常温研碎,加入0.5mL提取液,适当研磨后快速转移到离心管中,置于80℃水浴锅中10min,振荡3~5次,冷却后,离心取上清,加入2mg试剂五,80℃脱色30min,再加入0.5mL提取液,离心后取上清液测定。
二、测定步骤:
1、 分光光度计或酶标仪预热30min以上,调节波长至480nm,蒸馏水调零。
2、 样本测定,(在1.5mL EP管中依次加入下列试剂):
试剂(μL)
空白管
标准管
测定管
样本
25
试剂一
25
蒸馏水
25
试剂二
15
15
15
混匀,100℃煮沸5min左右(盖紧,防止水分散失)
试剂三
175
175
175
试剂四
50
50
50
混匀,沸水浴反应10min左右,冷却后取200μL至微量玻璃比色皿或96孔板中测定480nm处光吸收值,空白管、标准管和测定管分别记为A1、A2和A3。
三、植物蔗糖含量测定试剂盒蔗糖含量计算:
1、按照蛋白质含量计算
蔗糖含量(mg/mg prot)= (C 标准管×V1)×(A3-A1)÷(A2-A1) ÷(V1×Cpr)= (A3-A1)÷(A2-A1) ÷Cpr
此法需要自行测定蛋白浓度。
2、 按照样品质量计算
蔗糖含量(mg/g鲜重)=(C 标准×V1)×(A3-A1)÷(A2-A1)÷(W×V1÷V2)=(A3-A1)÷(A2-A1)÷W
C标准管:标准管浓度,1mg/mL;V1:加入样本体积,0.025mL;V样总:加入提取液体积,1mL; Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mL;W:样本鲜重,g。
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